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Los alcaloides de toluidina, como la anisodamina y la ciperina, tienen importantes actividades biológicas y un valor medicinal clínico. Estos alcaloides se obtienen principalmente mediante métodos de extracción tradicionales de las plantas originales, y la tecnología de síntesis heteróloga microbiana basada en la biología sintética proporciona una nueva estrategia para la preparación de medicamentos naturales. productos. En la biosíntesis de n-metilpirrolidina, se utilizó l-ornitina como precursor, que fue catalizada por ornitina.

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Con el fin de construir células heterólogas y la síntesis de N - metil pirrolina chasis XiaoYouLi equipo penacho plano y xiao-dong li zhou grupo de investigación, los investigadores realizaron la siguiente investigación: 1) el primero analizó la fuente de la planta medicinal tres puntos AaDAO2 amina oxidasa y AaDAO3 función bioquímica, fuente y liga de acoplamiento coca ornitina descarboxilasa EcODC y putrescina fuentes de anisodus tanguticus – N – metil transferasa a un recipiente catálisis enzimática in vitro síntesis y cribado de EcODC, AtPMT y AaDAO3 síntesis in vitro de N – metil pirrolina módulo catalítico óptimo ;2) los tres genes estructurales de este módulo se introdujeron en Escherichia coli y Saccharomyces cerevisiae para construir las células de chasis correspondientes y realizar la prueba de fermentación con agitación.El compuesto objetivo n-metilpirrolio se obtuvo con éxito con un rendimiento de 3,02 y 2,07 mg/L respectivamente.3) Sobre la base de esto, con el fin de aumentar aún más la producción, la investigación también golpeó, además del chasis de las células de levadura, en N – Enzimas relacionadas con las rutas metabólicas de competencia de metil pirrolina ALD4, ALD5 y HFD1, al mismo tiempo expresan SAM2 fortalecido a través de una enzima clave sintética AtPMT síntesis catalítica de cofactores requeridos para SAM, eventualmente el chasis de células de levadura en N - rendimiento de metil pirrolina alcanzó 17.82 mg / L, en comparación con la cepa original aumentó 8,6 veces.

Este estudio fue el primero en construir una célula de chasis microbiana para la síntesis heteróloga de n-metilpirrolidina, que sentó una base importante para el análisis y la síntesis heteróloga de alcaloides medicinales precursores de n-metilpirrolidina.

La investigación también fue apoyada por el profesor de medicina tradicional china de la Universidad de Zhejiang, Zhang Chuanyin, y financiada por la Academia de Ciencias de China. del centro para la excelencia de plantas moleculares


Hora de publicación: 28-may-2020